Status of Rhipicephalus microplus resistance to ivermectin, fipronil and fluazuron in Mato Grosso do Sul, Brazil / Status da resistência de Rhipicephalus microplus a ivermectina, fipronil e fluazuron em Mato Grosso do Sul

Abstract Southern cattle tick resistance to pour-on and injectable acaricides has yet to be evaluated on a broader scope, and the paucity of information on the subject may hinder efforts to control this parasite. The objective of this study was to evaluate the resistance profile of ten populations of Rhipicephalus microplus to the acaricides fluazuron, fipronil and ivermectin in cattle herds in Mato Grosso do Sul, Brazil. The larval immersion test (LIT) was used to evaluate susceptibility to ivermectin and fipronil and the adult immersion test (AIT) was performed to evaluate fluazuron. Samples were randomly obtained in ten farms, and in general, we found resistance in five samples to fluazuron and in four samples to ivermectin and fipronil. Six samples showed incipient resistance to ivermectin and fipronil. Five of the ten evaluated samples showed resistance and/or incipient resistance to all the active ingredients, and the other five to two active ingredients. Among the samples classified as resistant, the average resistance ratio for ivermectin was 2.75 and 3.26 for fipronil. These results demonstrate the advanced status of resistance to the most modern chemical groups for the control of R. microplus in the state of Mato Grosso do Sul.

Resumo A resistência do carrapato-do-boi a acaricidas com modo de aplicação "pour-on" e injetáveis é pouco avaliada em estudos mais abrangentes, e essa escassez de informação pode resultar falhas no seu controle. Este estudo teve como objetivo avaliar o perfil de resistência em dez populações de Rhipicephalus microplus aos acaricidas fluazuron, fipronil e ivermectina, em rebanhos bovinos em Mato Grosso do Sul, Brasil. A caracterização fenotípica da resistência foi realizada por meio do teste de imersão de adultos (AIT) para o fluazuron, e teste de imersão de larvas (LIT) para fipronil e ivermectina. As amostras foram obtidas aleatoriamente em dez fazendas, sendo diagnosticada resistência em cinco amostras ao fluazuron e em quatro amostras à ivermectina e fipronil. Seis amostras apresentaram resistência incipiente à ivermectina e fipronil. Cinco das dez amostras avaliadas apresentaram resistência e / ou resistência incipiente a todos os princípios ativos, e as outras cinco a dois princípios ativos. Entre as amostras classificadas como resistentes, a média do fator de resistência para ivermectina foi de 2,75 e de 3,26 para fipronil. Esses resultados demonstram o avançado estado de resistência aos mais modernos grupos químicos para o controle de R. microplus em Mato Grosso do Sul.

Use of anti-tick drugs in dairy farms in the microregion of Alfenas, Minas Gerais, Brazil / Uso de carrapaticidas em fazendas leiteiras na microrregião de Alfenas, Minas Gerais, Brasil

Abstract Ectoparasitic infestation in dairy cattle, the most common being Rhipicephalus (Boophilus) microplus, causes significant loss in production. The control of ectoparasites often occurs incorrectly, resulting in resistance to the active ingredients and residues in milk. To understand of acaricide use in the microregion of Alfenas, Minas Gerais (Brazil), questionnaires were applied to the owners of 100 dairy farms in the region and were selected randomly. Dairy farms were allocated according to production scale: up to 150 liters/day, 151-400 liters/day and more than 400 liters/day. The interviewees were asked about production characteristics, acaricide management and active ingredients. The interview answers were subjected to descriptive analysis. Results showed that all properties, independent of production-scale, used acaricides. The most cited was: Cypermethrin Chlorpyrifos Citronellal (31%), Fluazuron (18.6%) and Fipronil (17%). Among the interviewed, 41,1% use drugs that have restrictions that are not allowed in legislation for use in lactating dairy cows (fluazuron, fipronil, ivermectin). 15% affirmed they weren't aware of the "withdrawal period" of medication and 73% change in the active ingredient used. In order to revert this antiparasitic drug's resistance situation and contamination of milk with drug residues, it is necessary to focus on the awareness of milk producers and training of labor.

Resumo A infestação por ectoparasitas em bovinos leiteiros, sendo o mais comum o Rhipicephalus (Boophilus) microplus, causa prejuízos significativos na produção. No entanto, o controle dos ectoparasitas geralmente ocorre incorretamente, resultando em resistência aos princípios ativos e presença de resíduos no leite. Para entender os padrões de uso de acaricidas na microrregião de Alfenas, Minas Gerais, Brasil, foram aplicados questionários aos proprietários de 100 fazendas leiteiras que foram classificadas de acordo com uma escala de produção: até 150 litros/dia, de 151 a 400 litros/dia e mais de 400 litros/dia. Os entrevistados foram questionados sobre características da produção, manejo do acaricida de gado e conhecimento sobre os princípios ativos. Todas as propriedades, independentemente da escala de produção, usavam acaricidas. Foram citados com maior frequência: Cipermetrina + Clorpirifós + Citronelal (31%), Fluazuron (18.6%) e Fipronil (17%). Entre os produtores entrevistados, 41,1 % fazem uso de drogas com restrição que não são atualmente permitidas na legislação para uso em vacas em lactação (fluazuron, fipronil, ivermectina). 15% dos produtores de leite afirmaram não estar cientes do "período de carência" dos medicamentos; outros relatam trocas constantes do princípio ativo utilizado. Para reverter a situação do uso indiscriminado de antiparasitários, é necessário focar na conscientização dos produtores de leite e na formação do trabalho.

Chemoprophylaxis for babesiosis and anaplasmosis in cattle: case report / Quimioprofilaxia para babesiose e anaplasmose em bovinos: relato de caso

Abstract Cattle tick fever (CTF) causes significant economic losses in the livestock sector. The pathogenic action of the hemoparasites is associated with anemia, weight loss, abortion and reduced productivity, which result with animal death. Programs to prevent CTF involve several procedures, including immunization, chemoprophylaxis and use of ectoparasiticides, together with the vector control in the environment. The objective of this study was to report an acute outbreak of CTF in a group of 157 Hereford cattle from a farm without presence of the vector, that were moved to a farm in the same state with a high tick infestation (Rhipicephalus microplus). On the day before the transportation, the animals received a chemoprophylaxis with imidocarb dipropionate (3 mg/kg, SC), which was repeated 21 days after the first application. After 42 days, some animals showed signs compatible with CTF, which was confirmed through clinical examination, necropsy, histopathological and hemoparasitological analyses. The morbidity rate was 37.6% and the mortality rate was 24.8%. Calves that were recently weaned were the group most affected with the tick fever, morbidity (100% and mortality (73%). Chemoprophylaxis in association with use of ectoparasiticides was not sufficient to control the outbreak of the disease.

Resumo A "tristeza parasitária bovina" (TPB) gera importantes perdas econômicas na bovinocultura mundial. A ação patogênica dos hemoparasitas resulta em anemia, perda de peso, abortos e diminuição da produtividade, culminando, muitas vezes, em óbito dos animais. Um programa de prevenção para TPB necessita de medidas integradas, como a imunização, quimioprofilaxia e utilização de ectoparasiticidas, em conjunto com ações que visem ao controle ambiental dos vetores. Este artigo tem em vista o relato de um surto de TPB em uma fazenda de produção de bovinos de corte e com alta infestação do carrapato (Rhipicephalus microplus). A fazenda adquiriu 157 animais puros de origem, da raça Hereford, proveniente de uma fazenda sem presença do vetor. No dia anterior ao transporte, os animais receberam quimioprofilaxia com dipropionato de imidocarb (3mg/Kg/SC), repetindo-se 21 dias após a primeira aplicação. Aos 42 dias, alguns bezerros manifestaram sinais clínicos compatíveis com TPB, sendo confirmado pelo exame clínico, necropsia, análises histopatológicas e hemoparasitológicas. A morbidade foi de 37,6% (59/157), e a letalidade de 24,8% (39/157). A categoria de bezerros recém desmamados foi a mais acometida, com morbidade de 100% (52/52) e letalidade de 73% (38/52). A quimioprofilaxia associada à utilização de ectoparasiticidas foram insuficientes para evitar a ocorrência do surto da enfermidade.

High seroprevalence and associated factors for visceral leishmaniasis in dogs in a transmission area of Paraíba state, Northeastern Brazil / Alta soroprevalência e fatores associados da leishmaniose visceral canina em área de transmissão do Estado da Paraíba, Nordeste do Brasil

Abstract Dogs have been implicated as main reservoirs for visceral leishmaniasis (VL) in urban areas. Therefore, studies on this species provide important data for public health. Thus, the objective of the present study was to ascertain the seroprevalence of canine VL (CVL) and the associated factors in the Brejo Paraibano microregion, northeastern Brazil. A total of 409 dogs were sampled from the eight municipalities of the microregion: Alagoa Grande, Alagoa Nova, Areia, Bananeiras, Borborema, Matinhas, Pilões and Serraria. The diagnosis of CVL was made using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA S7®), through which the prevalence observed was 29.3%. By robust Poisson regression analysis two factors were associated with seroprevalence: illiterate/incomplete elementary owner's education level (prevalence ratio = 1.57; 95% CI = 1.05-2.34; p-value = 0.027) and tick infestation (prevalence ratio = 1.82; 95% CI = 1.27-2.61; p-value = 0.001). It is concluded that the seroprevalence of CVL in the Brejo Paraibano microregion is high. The factors associated with seroprevalence indicated the importance to develop socioeducational actions on the population, and the finding that tick infestation was associated with seroprevalence shows that there is a need for investigation regarding the role of ticks in the epidemiology of CVL.

Resumo Os cães são apontados como principais reservatórios da leishmaniose visceral (LV) em áreas urbanas. Portanto, estudos com essa espécie fornecem dados importantes para a saúde pública. Assim, o objetivo do presente estudo foi determinar a soroprevalência da leishmaniose visceral canina (LVC) e os fatores associados na microrregião do Brejo Paraibano, Nordeste do Brasil. Foram amostrados 409 cães dos oito municípios da microrregião: Alagoa Grande, Alagoa Nova, Areia, Bananeiras, Borborema, Matinhas, Pilões e Serraria. O diagnóstico de LVC foi realizado com o ensaio imunoenzimático (kit ELISA S7®), no qual a prevalência observada foi de 29,3%. Pela análise de regressão de Poisson robusta, dois fatores foram associados à soroprevalência: proprietário analfabeto ou com ensino fundamental incompleto (razão de prevalência = 1,57; IC 95% = 1,05-2,34; p-valor = 0,027) e infestação de carrapatos (razão de prevalência = 1,82; IC 95% = 1,27-2,61; p-valor = 0,001). Conclui-se que a soroprevalência da LVC na microrregião Brejo Paraibano é alta. Os fatores associados à soroprevalência indicaram a importância do desenvolvimento de ações socioeducativas na população, e a associação da infestação de carrapatos com a soroprevalência mostra que há necessidade de investigação sobre o papel dos carrapatos na epidemiologia da LVC.

Amblyomma nodosum Neumann, 1889 on collared anteaters (Tamandua tetradactyla) from the Andean region of Colombia / Amblyomma nodosum Neumann, 1889 em Tamanduá-mirim (Tamandua tetradactyla) da Região Andina Colombiana

Abstract Amblyomma nodosum is a Neotropical tick species distributed from Mexico to Argentina, with adult individuals infesting different mammal species, including anteaters (Pilosa: Myrmecophagidae). Few reports in Colombia have recorded this species in departments such as Meta, Tolima and Valle del Cauca. In this paper we describe this species using taxonomic, morphometric and molecular methods after collecting individuals parasitizing collared anteaters (Tamandua tetradactyla) in the departments of Cundinamarca and Tolima. Adult specimens were identified based on current taxonomic keys and different morphometric variables were documented in nonengorged individuals. Also, DNA was extracted for PCR amplification and sequencing of 16S rDNA, COI and ITS2 genes. Phylogenetic trees were built. One hundred and thirty-four adult ticks were collected and identified as Amblyomma nodosum, based on morphological, morphometric, molecular and phylogenetic analyses. This is the first study to report the presence of this tick species in the department of Cundinamarca, using multiple identification approaches, thus expanding its geographical records in Colombia.

Resumo Amblyomma nodosum é uma espécie de carrapato Neotropical distribuída do México à Argentina com indivíduos adultos, infestando diversas espécies de mamíferos, incluindo tamanduás (Pilosa: Myrmecophagidae). Na Colômbia, limitados relatos têm registrado essa espécie em alguns departamentos como Meta, Tolima e Valle del Cauca. Neste trabalho, espécimes foram identificados por meio de métodos taxonômicos, morfométricos e moleculares após serem coletados parasitando indivíduos de tamanduá-mirim (Tamandua tetradactyla) dos departamentos de Cundinamarca e Tolima. Espécimes adultos foram identificados por meio de chaves taxonômicas e diversas variáveis morfométricas foram ristradas em indivíduos não ingurgitados. Além disso, o DNA foi extraído para amplificação pela PCR e por sequenciamento dos genes 16S rDNA, COI e ITS2. Árvores filogenéticas foram construídas. No total, 134 carrapatos adultos foram coletados e identificados como Amblyomma nodosum por meio de análises morfológicas, morfométricas, moleculares e de filogenia. Este é o primeiro estudo que relata, por meio de múltiplas ferramentas de identificação, esta espécie no departamento de Cundinamarca ampliando assim seus registros geográficos na Colômbia.

Ticks in wild animals at a resort and the first documentation of Amblyomma sculptum infesting Emu (Dromaius novaehollandiae) / Carrapatos em animais selvagens em um resort e o primeiro registro de Amblyomma sculptum infestando Emu (Dromaius novaehollandiae)

Abstract The study aimed to identify species of ticks present in the environment and among captive animals, in Mangaratiba, Rio de Janeiro, Brazil. Ticks were isolated from captive animals by manual examination and free-living ticks in the environment were captured using the flannel drag technique. A total of 91 ticks were obtained (51 adults, 25 nymphs and 15 larvae). The specimens were identified morphologically as Amblyomma sp., Amblyomma dubitatum, Amblyomma ovale and Amblyomma sculptum , and were distributed among five species of native mammals and an exotic bird. This study also reports the first case of infestation of the Australian emu (Dromaius novaehollandiae) by A. sculptum.

Resumo O estudo teve como objetivo identificar espécies de carrapatos presentes no ambiente e entre animais de cativeiro em Mangaratiba, Rio de Janeiro, Brasil. Os carrapatos foram removidos manualmente de animais de cativeiro e no ambiente usando a técnica de arrasto em flanela. Um total de 91 carrapatos foram capturados (51 adultos, 25 ninfas e 15 larvas). Os espécimes foram identificados morfologicamente como Amblyomma sp., Amblyomma dubitatum, Amblyomma ovale e Amblyomma sculptum, e foram distribuídos entre cinco espécies de mamíferos nativos e uma ave exótica. Este estudo também relata o primeiro caso de infestação do emu australiano (Dromaius novaehollandiae) por A. sculptum .

In vivo effect of diflubenzuron, administered via mineral salt supplementation, against Haematobia irritans and Rhipicephalus microplus parasitizing cattle / Efeito in vivo do diflubenzuron, administrado via sal mineral, contra Haematobia irritans e Rhipicephalus microplus parasitando bovinos

Abstract This study involved two field trials with the aim of evaluating the efficacy of diflubenzuron, via mineral supplementation, against Haematobia irritans parasitizing cattle. Concomitantly with the main trial, a stall test was conducted to ascertain the effects of a different formulation with the same active ingredient against Rhipicephalus microplus, along with the action of diflubenzuron on the reproductive parameters of R. microplusfemales that had naturally detached from cattle. Against H. irritans, it was observed that the efficacy indexes fordiflubenzuron were low (≤ 31.3% or 44.6%) or null (0.0%) throughout the study. The anti- R. microplus efficacy of diflubenzuron, at weekly intervals, ranged from 0.0 to 13.7% over the entire experimental period. Null efficacy (0.0%) was registered for diflubenzuron in relation to the reproductive parameters of R. microplusfemales that had naturally detached from cattle. The different diflubenzuron formulations, administered via mineral salt supplementation, did not show satisfactory efficacy indexes against H. irritans and R. microplus parasitizing cattle, within the experimental design of the present study. In addition, this agent did not present any deleterious effects on the reproductive parameters of R. microplus females.

Resumo O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do diflubenzuron, administrado via suplementação mineral, contra Haematobia irritans parasitando bovinos, em dois testes à campo. Concomitantemente, foi realizado testes em estábulo para determinar os efeitos de uma formulação diferente, com o mesmo princípio ativo, contra Rhipicephalus microplus , bem como a ação do diflubenzuron nos parâmetros reprodutivos de fêmeas de R. microplus recolhidas após desprendimento natural do hospedeiro bovino. Contra H. irritans, foi observado que foram baixos (≤ 31,3% ou 44,6%) ou nulos (0,0%) os índices de eficácia do diflubenzuron. A eficácia anti-R. microplus do diflubenzuron, observada em intervalos semanais, variaram de 0,0% a 13,7% durante todo o período experimental. Com relação aos parâmetros reprodutivos das fêmeas de R. microplus recolhidas, foi observada eficácia nula (0,0%) para o diflubenzuron. Conclui-se que as diferentes formulações administradas via sal mineral no atual estudo, contra H. irritans e R. microplus parasitando bovinos, não apresentaram eficácia satisfatória. Este agente também não mostrou efeito deletério sobre os parâmetros reprodutivos de fêmeas de R. microplus.

Ticks parasitizing wild mammals in Atlantic Forest areas in the state of Rio de Janeiro, Brazil / Carrapatos parasitando mamíferos silvestres em áreas da Floresta Atlântica no estado do Rio de Janeiro, Brasil

Abstract Mammals captured in the Serra dos Órgãos National Park (PARNASO) and the Pedra Branca State Park (PBSP) between 2012 and 2015 were examined for the presence of ticks. In total, 140 mammals were examined, and 34 specimens were found to be parasitized by ticks. Didelphis aurita, Akodon montensis and Oligoryzomys nigripes were the species most parasitized. From these specimens, 146 ticks were collected, including 10 larvae. The ticks belonged to eight species: one in the genus Ixodes and seven in the genus Amblyomma. This study reports new associations of ticks and wild mammals in Brazil.

Resumo Mamíferos capturados no Parque Nacional da Serra dos Órgãos (PARNASO) e no Parque Estadual Pedra Branca (PBSP) entre 2012 e 2015 foram examinados quanto à presença de carrapatos. No total, 140 mamíferos foram examinados, e 34 espécimes foram parasitados por carrapatos. Didelphis aurita, Akodon montensis e Oligoryzomys nigripes foram as espécies mais parasitadas. A partir desses espécimes, 146 carrapatos foram coletados, incluindo 10 larvas. Os carrapatos pertenciam a oito espécies: uma no gênero Ixodes e sete no gênero Amblyomma. Este estudo relata novas associações de carrapatos e mamíferos silvestres no Brasil.

Persistence and efficacy of a new formulation based on dog allomonal repellents against Rhipicephalus sanguineus sensu lato tick / Persistência e eficácia de uma nova formulação baseada em repelentes alomônios de cães contra o carrapato Rhipicephalus sanguineus sensu lato

Abstract Beagles are less susceptible to Rhipicephalus sanguineus sensu lato tick due to the production of the allomones benzaldehyde and 2-hexanone. Our previous published work showed that these compounds can reduce tick burden on susceptible dogs. Here we tested the hypothesis that an increase in repellent dose and release rate could increase repellent efficacy and persistence. Slow-release formulations of these compounds, with higher doses and release rates, were tested on artificially-infested dogs. Ten dogs were randomly assigned to two groups with five dogs each. The treated group received collars with slow-release formulations of the compounds attached, while the control group received collars with clean formulations attached. Five environmental infestations were performed, with the number of ticks (at all stages) on the dogs being counted once a day for 40 days. No significant increase in repellent efficacy was observed with the higher doses and release rates, whereas a greater persistence in repellent activity was observed. Treatment with the formulations resulted in a two-to-three-fold reduction in the number of immature stage ticks for up to three weeks. However, the number of adults was similar in both groups. Loss of repellent activity after the third week of testing coincided with a marked change in the relative release rates for the two compounds. It is hypothesized that relative amounts, rather than absolute amounts, of repellent release from slow-release formulations are important for repellent activity. We also hypothesize that the avoidance of less-preferred hosts by ticks relies on olfactory-mediated perception of specific blends of volatile cues from less preferred hosts.

Resumo Beagles são menos suscetíveis ao carrapato Rhipicephalus sanguineus sensu lato devido à produção de benzaldeído e 2-hexanona. Nosso trabalho anterior já publicado mostrou que esses compostos podem reduzir a carga de carrapatos em cães suscetíveis. Aqui testamos a hipótese de que um aumento na dose destes repelentes e na taxa de liberação poderia aumentar a eficácia e a persistência do efeito repelente. As formulações de liberação lenta destes compostos, com doses e taxas de liberação mais elevadas foram testadas em cães infestados artificialmente. Dez cães foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos com cinco cães cada. O grupo tratado recebeu colares contendo formulações de liberação lenta dos compostos, enquanto o grupo controle recebeu colares com formulações limpas. Cinco infestações ambientais foram realizadas, com o número de carrapatos (em todas as fases) nos cães sendo contados, uma vez ao dia, por 40 dias. Não se observou aumento significativo na eficácia do repelente com doses e taxas de liberação mais elevadas e, enquanto observou-se maior persistência na atividade repelente. O tratamento com as formulações resultou em uma redução de duas a três vezes no número de carrapatos dos estágios imaturos, por até três semanas. No entanto, o número de adultos foi semelhante em ambos os grupos. A perda de atividade repelente após a terceira semana de teste coincidiu com uma mudança nas taxas de liberação relativa para os dois compostos. A hipótese é que as quantidades relativas, ao invés das quantidades absolutas de liberação lenta, são importantes para a atividade repelente. Então, a hipótese é de que a repelência apresentada por hospedeiros menos susceptíveis aos carrapatos depende da percepção pelos carrapatos de misturas específicas de voláteis liberados por estes hospedeiros.

Ticks infesting captive and free-roaming wild animal species at the São Paulo Zoo, São Paulo, Brazil / Carrapatos infestando espécies de animais silvestres cativas e de vida livre no Zoológico de São Paulo, São Paulo, Brasil

Abstract Ticks are ectoparasites of worldwide distribution that affect vertebrates and can transmit pathogens to animals and humans. The Zoological Park Foundation of São Paulo (FPZSP) is located in a Conservation Unit in one of the most important remaining fragments of the Atlantic Rainforest biome in the suburbs of São Paulo, Brazil. The FPZSP houses more than 3,000 wild animals on exhibit, in breeding programs and in environmental education programs, and also attracts migratory birds and free-roaming wildlife. This study focused on identifying the diversity of tick species that infest captive and free-roaming animals at the FPZSP. The collection of ticks kept at the FPZSP contains 523 specimens that were collected from different host species between 1990 and 2017. Ten tick species were found. In addition, Amblyomma aureolatum (Pallas) was found on stray cats living in the Atlantic forest fragment in the FPZSP. This study reveals a low occurrence of parasitism in captive animals and a high diversity of tick species collected from hosts in this Atlantic forest fragment, contributing information about host-parasite relationships and potential vectors of zoonotic diseases, since the vectors of Brazilian spotted fever, A. aureolatum and Amblyomma sculptum Berlese, were found in some hosts.

Resumo Os carrapatos são ectoparasitas da classe Arachnida, conhecidos como importantes vetores de agentes infecciosos para animais e humanos. A Fundação Parque Zoológico de São Paulo (FPZSP) localizada em uma Unidade de Conservação do bioma Mata Atlântica e inserida na cidade de São Paulo, mantém mais de 3.000 animais selvagens cativos, abrigando ainda diversas espécies silvestres nativas da Mata Atlântica. Devido à importância do conhecimento dos carrapatos que parasitam a fauna selvagem, o objetivo deste trabalho foi identificar a coleção de carrapatos da FPZSP e analisar a diversidade desses parasitas em animais cativos e de vida livre. O acervo de carrapatos mantidos pela FPZSP contém 523 exemplares que foram coletados de diferentes espécies hospedeiras, desde 1990 até 2017. Dez espécies de carrapatos foram encontradas. Além dos animais silvestres, foram encontrados Amblyomma aureolatum (Pallas) em gatos domésticos errantes que circulam nas áreas da FPZSP. Este trabalho demonstra a baixa ocorrência de parasitismo em animais cativos e a alta diversidade de carrapatos nos hospedeiros deste fragmento de Mata Atlântica, contribuindo com informações sobre a relação parasita-hospedeiro e potenciais vetores de doenças zoonóticas, já que os vetores da Febre Maculosa Brasileira A. aureolatum e Amblyomma sculptum Berlese, foram encontrados em alguns hospedeiros.

Detección de Leishmania (V) guyanensis en ejemplares de Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari: Ixodidae) recolectados en pecaríes de collar (Pecari tajacu) / Detection of Leishmania (V) guyanensis in Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari: Ixodidae) collected from Pecari tajacu

Resumen Introducción. En estudios previos se detectó la presencia de Leishmania infantum en Rhipicephalus sanguineus, lo cual planteaba la posibilidad de que R. sanguineus transmitiera la leishmaniasis a una variedad de huéspedes. Objetivo. Identificar Leishmania (Viannia) spp. en garrapatas recolectadas en animales silvestres de una zona endémica para leishmaniasis. Materiales y métodos. Se hicieron 81 extracciones individuales de ADN en las garrapatas recogidas de tres tapires o dantas (Tapirus terrestres) y tres pecaríes de collar (Pecari tajacu) cazados en Madre de Dios, Perú. Las garrapatas recolectadas se identificaron taxonómicamente y se prepararon para la identificación del cinetoblasto (kDNA) de Leishmania (Viannia) spp. mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR), así como de la especie de Leishmania mediante PCR de fusión de alta resolución (High Resolution Melt, HRM). Resultados. Se detectó el kDNA de Leishmania (V) spp. en tres garrapatas silvestres de R. (Boophilus) microplus, Canestrini, 1888, recolectadas en un pecarí de collar cazado en la selva de Madre de Dios. El análisis mediante HRM-PCR evidenció que una de las muestras positivas de kDNA tenía una curva compatible con L. (V) guyanensis. Conclusión. Los resultados evidenciaron la presencia de ADN de L. (V) guyanensis en R. (Boophilus) microplus, probablemente adquirida después de picar al pecarí. Es importante hacer nuevos estudios para aclarar la participación de R. (Boophilus) microplus en la transmisión de la leishmaniasis.

Abstract Introduction: Previous studies identified the presence of Leishmania infantum in Rhipicephalus sanguineus and indicated the possibility that it could transmit leishmaniasis to a variety of hosts. Objective: To identify parasites of Leishmania (Viannia) spp. in ticks collected from wild animals in an endemic area for leishmaniasis. Materials and methods: We performed 81 individual DNA extractions from ticks collected from three Tapirus terrestris and three Pecari tajacu in Madre de Dios, Perú. Ticks were taxonomically identified and they were subsequently prepared to identify Leishmania (Viannia) spp. kDNA by PCR and the species of Leishmania by HRM-PCR. Results: Leishmania (Viannia) kDNA was detected in three wild ticks of the species R. microplus, collected from a collard peccary (P. tajacu) hunted in the forests of Madre de Dios. The HRM-PCR showed that one of the positive samples had a kDNA curve compatible with L. (V) guyanensis. Conclusion: The results showed the presence of L. (V) guyanensis DNA in R. microplus possibly acquired after biting a collarde peccary. Therefore, it is important to design future studies to clarify R. microplus involvement in the transmission of leishmaniasis.

Infestação por carrapatos Argasidae e Ixodidae em pequenos mamíferos silvestres da Estação Experimental Rafael Fernandes, Mossoró/RN / Infestation by ticks Argasidae and Ixodidae on small wild mammals at the Experimental Station Rafael Fernandes, Mossoró/RN, Brazil

Poucos estudos avaliaram a diversidade de ectoparasitos e a associação deles com seus hospedeiros que ocorrem no bioma Caatinga, Nordeste do Brasil. Considerando-se essa falta de conhecimento, este estudo objetivou identificar e determinar a ocorrência de carrapatos coletados de pequenos mamíferos da Estação Experimental Rafael Fernandes, no Rio Grande do Norte, Brasil. De janeiro de 2014 a fevereiro de 2015 foram capturados 52 marsupiais (38 Gracilinanus agilis e 14 Monodelphis domestica) e 10 roedores (5 Wiedomys sp., 4 Thrichomys sp. e 1 Rattus norvegicus). Foram identificados os carrapatos Amblyomma auricularium, Amblyomma parvum, Amblyomma sp., Ornithodoros mimon e Ornithodoros sp., empregando estudo morfológico, chaves taxonômicas e sequenciamento parcial do gene mitocondrial 16S rDNA de carrapatos. Todas as associações carrapato-hospedeiro encontradas neste estudo são relatadas pela primeira vez no Rio Grande do Norte e constituem novos dados ecológicos aplicáveis aos ectoparasitos de pequenos mamíferos no nordeste do Brasil.(AU)

Few studies have assessed the diversity of ectoparasites and their associated hosts occurring within the Caatinga biome in northeastern Brazil. Considering this lack of knowledge, in this study we aimed to identify and determine the occurrence of ticks collected from small mammals at the Estação Experimental Rafael Fernandes, in Rio Grande do Norte state, Brazil. From January 2014 to February 2015, we captured 52 marsupials (38 Gracilinanus agilis and 14 Monodelphis domestica) and 10 rodents (5 Wiedomys sp., 4 Thrichomys sp. and 1 Rattus norvegicus). We identified the ticks Amblyomma auricularium, Amblyomma parvum, Amblyomma sp., Ornithodoros mimon and Ornithodoros sp. by a morphological study, the use of taxonomic keys, and the partial sequencing of the tick mitochondrial 16S rDNA gene. All the tick-host associations found in this study are reported for the first time in Rio Grande do Norte and constitute new ecological data concerning ectoparasites of small mammals in northeastern Brazil.(AU)

Bartonella species pathogenic for humans infect pets, free-ranging wild mammals and their ectoparasites in the Caatinga biome, Northeastern Brazil: a serological and molecular study

ABSTRACT This study verified the occurrence of Bartonella spp. in dogs, cats, wild mammals and their ectoparasites in Petrolina and Lagoa Grande Counties, Pernambuco, located in a semi-arid region in Northeastern Brazil. Anti-Bartonella spp. antibodies were detected by indirect immunofluorescence assay (IFA) in 24.8% of dogs (27/109) and in 15% of cats (6/40). Bartonella sp. DNA was identified by PCR performed on DNA extracted from blood and ectoparasites using primers targeting Bartonella sp. gltA and ribC genes in 100% (9/9) of Pulex irritans from Cerdocyon thous, 57.4% (35/61) of P. irritans from dogs, 2.3% (1/43) of Ctenocephalides felis felis from dogs, 53.3% (24/45) of C. felis felis from cats, and 10% (1/10) of Polyplax spp. from Thrichomys apereoides. DNA sequencing identified Bartonella clarridgeiae and Bartonella henselae in C. felis felis from cats, Bartonella rochalimae in P. irritans from dog and C. thous, and Bartonella vinsoni berkhofii in P. irritans from dog.

Immunogenic potential of Rhipicephalus (Boophilus) microplus aquaporin 1 against Rhipicephalus sanguineus in domestic dogs / Potencial imunogênico da aquaporina 1 de Rhipicephalus (Boophilus) microplus contra o carrapato Rhipicephalus sanguineus em cães domésticos

Abstract This study evaluated a recombinant aquaporin 1 protein of Rhipicephalus (Boophilus) microplus (RmAQP1) as antigen in a vaccine against R. sanguineus. Five dogs were immunized with RmAQP1 (10 µg) + adjuvant (Montanide) (G1), and five were inoculated with adjuvant only (G2), three times. Twenty-one days after the last immunization, animals of both groups were challenged with R. sanguineus larvae, nymphs and adults, and their biotic potential was compared. Blood samples were collected before each immunization and every 28 days after the last immunization for 10 weeks. Serum antibody titers (IgG) were assessed by ELISA. We observed that: engorgement period of adult females from G1 was 12% shorter than G2; larvae from G1 had 8.7% longer engorgement period than G2 and weighed 7.2% less; nymphs from G1 had 4.5% shorter engorgement period than G2 and weighed 3.6% less; although the antibody titers increased following the second immunization, they rapidly decreased after the third immunization. Results indicated low immunoprotection of RmAQP1 against adult R. sanguineus ticks, and possible efficacy on larvae and nymphs fed on immunized dogs. Further studies should be performed for a full evaluation of the immunoprotection of RmAQP1 against R. sanguineus infestations in dogs.

Resumo Este estudo avaliou a proteína recombinante (aquaporina) do carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus como antígeno em vacina contra Rhipicephalus sanguineus. Cinco cães foram imunizados com RmAQP1 (10 µg) + adjuvante (G1) e cinco foram inoculados apenas com adjuvante (G2), três vezes. 21 dias após a última imunização todos os animais foram desafiados com larvas, ninfas e adultos de R. sanguineus, e potencial biótico dos carrapatos foi comparado. Amostras de sangue foram coletadas antes de cada imunização e a cada 28 dias após a última imunização, durante 10 semanas. Títulos de anticorpos dos soros dos cães foram avaliados por ELISA. Resultados: o período de ingurgitamento das fêmeas do G1 foi 12% mais curto que o período de ingurgitamento de G2; o período de ingurgitamento das larvas do G1 8,7% foi mais longo e o peso 7,2% menor que no caso de G2; o período de ingurgitamento das ninfas do G1 4,5% foi mais curto e peso 3,6% menor que no caso do G2; aumento dos títulos de anticorpos do G1 após a segunda imunização e declínio após a terceira imunização. Os resultados indicaram baixo potencial de imunoproteção de RmAQP1 contra R. sanguineus adultos, e possível eficácia contra larvas e ninfas, na dose testada. Sugere-se desenvolver novos estudos para melhor avaliação da eficácia de RmAQP1 contra R. sanguineus em cães.

New records for Amblyomma sculptum (Ixodidae) on non-passerine birds in Brazil / Novos registros de Amblyomma sculptum (Ixodidae) em aves não-passeriformes no Brasil

Abstract The aim of this paper was to provide new records of Amblyomma sculptum on two species of terricolous birds in two areas of the Cerrado (savannah- like) bioma: two specimens of Cariama cristata were captured in the state of Goiás and one specimen ofCrax fasciolata was captured in the state of Minas Gerais. One of the C. cristata was parasitized by 15 larvae, six nymphs, one male and two females whereas the C. fasciolata was parasitized by seven larvae and eight nymphs. This paper presents a new locality for occurrence of parasitism A. sculptum in C. cristata and a new host for C fasciolata.

Resumo O objetivo deste trabalho foi apresentar novos registros de Amblyomma sculptum em duas espécies de aves terrícolas em duas áreas do bioma Cerrado: dois espécimes de Cariama cristata foram capturados no Estado de Goiás e um exemplar de Crax fasciolata foi capturado no Estado de Minas Gerais. Um dos exemplares de C. fasciolataestava parasitado por 15 larvas, seis ninfas, um macho e duas fêmeas, enquantoC. fasciolata estava parasitada por sete larvas e oito ninfas. Neste registro são apresentados nova localidade para ocorrência do parasitismo de A. sculptum em C. cristata e novo hospedeiro para C. fasciolata.

Patterns of parasitism by Amblyomma rotundatum (Ixodidae) on Rhinella schneideri (Bufonidae) in islands of São Francisco River, Minas Gerais, Brazil / Parasitismo por Amblyomma rotundatum (Ixodidae) em Rhinella schneideri (Bufonidae) em duas ilhas do Rio São Francisco, próximas à represa de Três Marias, Minas Gerais

We sampled ticks from specimens of the rococo toad Rhinella schneideriby flannel dragging on two Islands located in the São Francisco River near the Três Marias hydroelectric dam, southeastern Brazil. A total of 120 toads was examined, of which 63 (52.5%) were parasitized only by Amblyomma rotundatumtotaling 96 larvae, 163 nymphs and 134 females. The burden of parasitism ranged from one to 43 ticks, with a mean intensity of infestation of 6.2±5.5 ticks per host. The tick A. rotundatumexhibited highly aggregated distribution. Peak abundance of larvae and nymphs occurred in the dry season (May to September), whereas peak abundance of females occurred in the wet season (October to April). We collected most ticks near the head and hind limbs of R. schneideri. The finding of two engorged A. rotundatumnymphs in the same resting places of two toads and the absence of this species in the dragged areas suggest a nidicolous behavior at the studied site.

Sapos da espécie Rhinella schneideri foram capturados e examinados para coleta das fases parasitárias, assim como arrasto de flanela para coleta das fases de vida livres de carrapatos em duas ilhas localizadas no rio São Francisco , próximas à represa Três Marias, região sudeste do Brasil. No total, 120 indivíduos foram examinados, dos quais 63 (52,5%) estavam parasitados por Amblyomma rotundatum totalizando 96 larvas, 163 ninfas e 134 fêmeas. A abundância do parasitismo variou de 1 a 43 carrapatos, com uma intensidade média de infestação de 6,2±5,5 carrapatos/hospedeiro. A infestação por A. rotundatumapresentou uma distribuição altamente agregada. O pico de abundância de larvas e ninfas ocorreu na estação seca (maio a setembro), enquanto o pico de abundância de fêmeas ocorreu na estação chuvosa (outubro a abril). A maioria dos carrapatos foi coletada na região da cabeça e membros posteriores. A presença de duas ninfas ingurgitadas de A. rotundatum nos mesmos lugares de descanso de dois sapos e a ausência desta espécie na coleta por arrasto de flanela sugere um comportamento nidicola no local estudado.

Detecção de Theileria equi e Babesia caballi e anticorpos anti-Ehrlichia spp. em equídeos do Pantanal Mato-Grossense, Brasil / Detection of Theileria equi, Babesia caballi and anti-Ehrlichia spp antibodies in equides from the Pantanal of Mato Grosso State

O presente estudo avaliou equídeos de 19 fazendas da região do Pantanal Mato-Grossense, sendo 121 equídeos testados pela reação em cadeia pela polimerase (PCR), para detectar fragmentos dos genes dos seguintes gêneros: Babesia, Theileria, Anaplasma, Ehrlichia, e Neorickettsia, e pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI), para detectar anticorpos anti-Ehrlichia spp. Das amostras testadas na PCR, 17 (14,0%) animais de nove (47,3%) fazendas foram positivos. Das amostras positivas, 16 foram 100% idênticas a sequencias de Theileria equi e uma foi 99% similar à sequência de Babesia caballi, todas disponíveis no GenBank. Pela RIFI, 48 (39,6%) equídeos foram soropositivos para antígenos de E. canis, sendo 40 (83,3%) amostras com títulos de 40 e oito (16,6%) com títulos de 320. Todas as fazendas avaliadas (100%) apresentaram equídeos soropositivos. Os resultados do presente estudo demonstram que T. equi e B. caballi infectam equinos na região, e a presença de anticorpos anti-Ehrlichia spp. indica a circulação de espécies antigenicamente relacionadas aos gêneros Ehrlichia e Anaplasma, apesar de a negatividade nos exames de PCR indicar provável processo crônico desses agentes.

The present study evaluated 121 equids from 19 ranches in the Pantanal region of Mato Grosso State through Polimerase Chain Raction (PCR) to detect Babesia, Theileria, Anaplasma, Ehrlichia and Neorickettsia partial genes and the Imunofluorescent Antibody Test (IFAT) to evaluate anti-Ehrlichia spp. antibodies. From the total tested in PCR, 17 (14.0%) equids from 9 (47.3%) farms were positive, and 16 yielded amplicons 100% identical to Theileria equi and one presented 99% similarity to Babesia caballi available on GenBank. Forty eight (39.6%) equids were positive by IFAT and 40 showed titers of 40 (83.3%) and 8 showed titers of 320 (16.6%). All ranches (100%) presented seropositive equids. Our results showed that T. equi and B. caballi are infecting equids in the region and the presence of anti-Ehrlichia antibodies suggests that species closely related to the genera Ehrlichia and Anaplasma are circulating among the equid local population. Moreover, the negative results in PCR is possibly related to the chronic infection phase.

Carrapatos (Acari: Ixodidae) em mamíferos silvestres do Parque Nacional da Serra da Canastra e arredores, Minas Gerais, Brasil / Ticks (Acari: Ixodidae) on wild mammals in the Serra da Canastra National Park and surrounding areas, Minas Gerais, Brazil

O presente estudo relata ixodídeos em mamíferos silvestres no Parque Nacional da Serra da Canastra e arredores, no estado de Minas Gerais, Brasil. De julho de 2005 a junho de 2014, foram coletadas 58 larvas, 133 ninfas e 43 carrapatos adultos em 40 eventos de captura de mamíferos de vida livre do Parque e arredores. Nos hospedeiros da ordem Carnivora, foram identificados Amblyomma ovale Koch, 1844, Amblyomma sculptum Berlese, 1888, Amblyomma tigrinum Koch, 1844, Dermacentor nitens Neumann, 1897 e Rhipicephalus microplus (Canestrini, 1888). Em hospedeiros da ordem Xenarthra, foram identificados espécimes de Amblyomma pseudoconcolor Aragão, 1908 e A. sculptum. Este estudo relata os primeiros registros dos ixodídeos D. nitens e R. microplus parasitando Lycalopex vetulus, e A. ovale em Leopardus tigrinus no país. Os achados do presente estudo indicam a proximidade entre os animais domésticos e silvestres causada pela expansão agropecuária no território brasileiro.

This research­­­­­ reports ticks on wild mammals from the Serra da Canastra National Park and surrounding areas, in Minas Gerais state, Brazil. From July 2005 to June 2014, 58 larvae, 133 nymphs and 43 adult ticks were collected in 40 capture events of free-living mammals at the Park and surrounding areas. The tick species Amblyomma ovale Koch, 1844, Amblyomma sculptum Berlese, 1888, Amblyomma tigrinum Koch, 1844, Dermacentor nitens Neumann, 1897, and Rhipicephalus microplus (Canestrini, 1888) were identified on hosts of the order Carnivora. Specimens of Amblyomma pseudoconcolor Aragão, 1908 and A. sculptum were identified on the hosts of the order Xenarthra. We provide the first records of D. nitens and R. microplus ticks parasitizing Lycalopex vetulus, and A. ovale on Leopardus tigrinus in Brazil. The findings of this research indicate the sharing of environment by domestic and wild animals caused by agricultural expansion in the Brazilian landscape.

Detección molecular de Rickettsia massiliae y Anaplasma platys en garrapatas Rhipicephalus sanguineus y caninos domésticos del municipio de Bahía Blanca (Argentina) / Molecular detection of Rickettsia massiliae and Anaplasma platys infecting Rhipicephalus sanguineus ticks and dogs, Bahía Blanca (Argentina)

Background: Rickettsioses, ehrlichioses and anaplasmoses are caused by Gram negative obligate intracellular bacteria and transmitted mainly by arthropods. Aim: To detect and perform the molecular characterization of these pathogens in ticks and domestic dogs in Bahia Blanca City (Buenos Aires, Argentina). Methods: Fifty six blood samples from dogs and 82 ticks (75 Rhipicephalus sanguineus and 7 Amblyomma tigrinum) were studied. The samples were analyzed by PCR for Rickettsia (intergenic space 23S-5S rRNA), Ehrlichia/Anaplasma (16S rRNA), and Anaplasma platys (16S rRNA). Results: 12% of R. sanguineus resulted positive for Rickettsia, identified by sequencing as Rickettsia massiliae; and 37.5% of the canine blood samples analyzed were positive for A. platys. Molecular characterization was also performed by amplification of the fragment of the citrate synthase gene (gltA) (Rickettsia genus) and the groESL gene (A. platys). Phylogenetic trees were constructed using the neighbor-joining method. These trees revealed that sequences obtained are similar to those from other geographical regions. Conclusion: The results indicate the presence of R. massiliae in R. sanguineus ticks for the second time in an urban area of South America and A. platys infection in dogs, being the southernmost region of Argentina where it has been notified.

Introducción: Las rickettsiosis, ehrlichiosis y anaplasmosis son causadas por bacterias gramnegativas, intracelulares obligadas y transmitidas principalmente por artrópodos. Objetivo: Detectar y caracterizar molecularmente estos patógenos en garrapatas y caninos domésticos del municipio de Bahía Blanca (provincia de Buenos Aires, Argentina). Material y Métodos: Se estudiaron 56 muestras sanguíneas de caninos, 75 garrapatas Rhipicephalus sanguineus y 7 Amblyomma tigrinum. Las muestras fueron analizadas por RPC para Rickettsia (espacio intergénico 23S-5S ARNr), Ehrlichia y Anaplasma (16S ARNr), y Anaplasma platys (16S ARNr). Resultados: Se detectó positividad a Rickettsia en 12% de R. sanguineus, identificándose por secuenciación a Rickettsia massiliae. Las muestras sanguíneas de los caninos resultaron en 37,5% positivas a A. platys. También se caracterizaron molecularmente por la amplificación del fragmento del gen citrato sintasa (gltA) (género Rickettsia) y del gen groESL (A. platys). Se construyeron árboles filogenéticos utilizando el método del vecino más cercano (neighbor-joining) revelando que las secuencias obtenidas son similares a las de otras regiones geográficas. Conclusión: Los resultados indican la presencia de R. massiliae en garrapatas R. sanguineus en una segunda zona urbana de Sudamérica y la infección por A. platys en caninos, siendo la región más austral de Argentina donde ha sido notificada.